人类原巨核细胞型白血病细胞UT-7细胞(提供STR鉴定报告)
平台编号:zl-057214
细胞信息:UT-7细胞
产品规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
(1)细胞描述:该细胞于1988年建系;源于一名64岁患有急性粒细胞白血病(AMLM7)的男性的骨髓;对多种细胞因子有反应。在本库通过STR鉴定结果正确,其STR鉴定结果如下:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:10,12;D18S51:14,17;D19S433:14,14.2;D21S11:31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8;D8S1179:11,15;FGA:23;TH01:6,9;TPOX:10;vWA:14,18,19;
(2)规格:T25方瓶或1ml冻存管
(3)细胞数量:1×10^6
(4)组织来源:人类原巨核细胞型白血病
(5)生长方式:悬浮生长
(6)细胞形态:淋巴母细胞样
(7)培养液:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
(8)培养条件:37℃,5%CO2
(9)运输方式:常温运输(T25方瓶)或干冰运输(冻存管)
细胞处理:
1)冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.
2.1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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